Spoľahlivosť laboratórnych vyšetrení nezávisí len od kvality samotnej analýzy vzorky, analytickej fázy, ale aj od kvality odberu, transportu, spracovania a uchovávania vzoriek, tzv. predanalytickej fázy. Dobrá znalosť predanalytickej fázy pomôže laboratóriu identifikovať mimolaboratórne vplyvy nesprávnych výsledkov laboratórnych vyšetrení.
Je zrejmé, že predanalytická fáza je neoddeliteľnou súčasťou laboratórneho vyšetrenia a často i samotnej analytickej metódy. Preto by mala byť predmetom záujmu tak klinických pracovníkov, ako i pracovníkov laboratória (lekárov, analytikov, laborantov).
Vzhľadom na to, že jednotlivé zložky predanalytickej fázy sú veľmi úzko späté, je potrebný komplexný prístup a tímová spolupráca klinikov a pracovníkov laboratórií.
Biopsia - Predanalytika
Predanalytická príprava vzorky je mimoriadne dôležitá z hľadiska získania kvalitného a relevantného výsledku laboratórneho vyšetrenia.
Všeobecné zásady pri odbere a fixácii vzoriek
Odber vždy vykonáva lekár so špecializáciou. Odoberá ho pri operačnom vyšetrení, ambulantnom alebo nemocničnom, pričom celý odobratý materiál posiela na jedno pracovisko. Ak ide o väčšie vzorky, môže na nich označiť patologické lézie. Odobratý materiál je nutné okamžite fixovať, čiže ponoriť do uzatvárateľnej nádoby s fixačným roztokom. Najčastejšie sa používa fixačný roztok 10 % formol. Ak ide o rýchlu predoperačnú biopsiu, je možné v krátkom čase doručiť odobratý materiál natívny.
Menej používaným fixačným roztokom je Carnoyov roztok, ktorý sa používa na lepšiu vizualizáciu lymfatických uzlín v prípadoch, kde je potrebné vyšetriť veľký počet lymfatických uzlín kvôli stagingu nádorového ochorenia. V Carnoyovom roztoku fixujeme najčastejšie tukovolymfatické tkanivo z týchto oblastí:
- axila (pri karcinóme prsníka)
- inguína (pri karcinómoch ženských pohlavných orgánov)
- cervikálna oblasť (pri karcinómoch hlavy a krku)
- gastrointestinálny trakt (pri kolorektálnych karcinómoch, karcinómoch žalúdka, pankreasu) Materiál pôvodne fixovaný formaldehydom je možné „dofixovať“ carnoyovým roztokom bez poškodenia tkaniva.
Formaldehyd je preferovaným fixačným roztokom aj z dôvodu, že takto fixované tkanivá vykazujú konzistentnejšiu expresiu imunohistochemických protilátok. Preto lymfatické uzliny, kde je suponované lymfoproliferatívne ochorenie, je ideálnejšie fixovať klasicky formaldehydom.
Označenie materiálu
Každý materiál musí byť jednoznačne identifikovateľný – na transportnej nádobe musí byť meno a priezvisko pacienta a rok jeho narodenia, v prípade cytologických náterov musí byť podložné sklo označené číslom prideleným v ambulancii lekára požadujúceho dané vyšetrenie.
S materiálom musí byť doručená aj žiadanka, ktorá musí obsahovať:
- meno a priezvisko pacienta,
- rodné číslo pacienta,
- označenie zdravotnej poisťovne pacienta,
- medzinárodný kód diagnózy,
- odtlačok pečiatky, kód a podpis lekára, kód poskytovateľa,
- ďalšie údaje potrebné na požadované vyšetrenie (PM, klinické údaje, čas odberu)
Odmietnutie vzorky biologického materiálu laboratóriom
Laboratórium za určitých okolností môže odmietnuť prijať a vyšetriť biologický materiál, a to v prípade, že:
- na žiadanke alebo nádobke s biologickým materiálom nie sú uvedené alebo sú nečitateľné údaje dôležité na identifikáciu vzorky,
- k materiálu nie je priložená žiadanka,
- nesúhlasia údaje na nádobke a žiadanke,
- je dodaný materiál, u ktorého boli zjavne porušené zásady správneho odberu, transportu alebo uloženia a je znehodnotený tak, že ho nie je možné vyšetriť,
- je kontaminovaná žiadanka alebo vonkajšia strana transportnej nádoby.
Odporúčania
Počet a závažnosť chýb v predanalytickej fáze so zameraním na cytologické a bioptické vyšetrenia je možné znížiť dodržiavaním týchto hlavných zásad minimalizácie chýb v predanalytickej fáze:
- identifikovať pacienta, a tým zabrániť zámene,
- skontrolovať označenie žiadaniek a odberových nádob s biologickým materiálom,
- používať vhodné transportné nádoby,
- používať správne fixačné roztoky a v dostatočnom množstve,
- podložné sklá uskladňovať a transportovať v transportných kazetách na to určených,
- nevystavovať vzorku extrémnym teplotám a svetlu,
- vzorku včas zaslať do laboratória.
Vzhľadom na to, že v súčasnosti sú s pribúdajúcimi kvalitnými prístrojovými technológiami a reagenciami sprísnené požiadavky na spracovanie vzoriek, t.j.:
- na kvalitu odberu biologického materiálu,
- transport do laboratória,
- prípravu vzorky,
- skladovanie biologického materiálu.
Podporný servis pre našich klientov
- poskytovania spotrebného materiálu (žiadanky, podložné sklá, odberové cytobrushe, transportné nádoby, fixačné roztoky),
- vlastného systému na transport vzoriek a výsledkov,
- služieb obchodného oddelenia, ktoré pravidelne monitoruje potreby a požiadavky klientov.
Cytologia - Predanalytika
Predanalytická príprava vzorky je mimoriadne dôležitá z hľadiska získania kvalitného a relevantného výsledku laboratórneho vyšetrenia.
Všeobecné zásady pri odbere vzoriek
Odber vzoriek pre gynekologickú cytológiu
Odber vzorky pre gynekologickú cytológiu vykonáva lekár-gynekológ. V súčasnosti sa na získanie kvantitatívne i kvalitatívne vyhovujúceho náteru najčastejšie používajú odberové inštrumenty ako cytobrush alebo cervex, pričom vzorka sa rovnomerne rozotrie po celej dĺžke podložného skla a fixuje sa. Pri použití cytobrushu sa náter vykonáva na jedno podložné sklo, pričom sa materiál natiera na opačné konce skla (simultatívny odber z ekto a endocervixu na jedno podložné sklo).
Pri odbere vzorky na vyšetrenie cervikálnej cytológie sa robí niekoľko závažných chýb, v dôsledku čoho sú nátery buď nedostatočne reprezentatívne alebo nevyhovujúcej kvality (napr. hrubý náter, sanquinolentný alebo zápalový náter). Takéto vzorky sú buď ťažko hodnotiteľné, vyžadujúce si opakovaný odber alebo v horšom prípade neadekvátne zhodnotené, čo môže viesť k tomu, že atypie v nátere nie sú detekované a vzorka je zhodnotená falošne negatívne. Preto je mimoriadne dôležité zhotoviť náter:
- reprezentatívny
- kvalitatívne vyhovujúci
Za reprezentatívny materiál možno považovať:
- náter dostatočne celulárny: podľa Bethesda propozícii vzorka by mala obsahovať viac ako 5 000 buniek
- náter má obsahovať obe epiteliálne zložky cervixu, t.j.:
- skvamózne bunky porcia
- glandulárne bunky z endocervikálneho kanála, eventuálne bunky skvamóznej metaplázie, ktoré často prekrývajú junkčnú zónu (t.j. oblasť prechodu oboch epitelov) u žien v reprodukčnom veku.
Pre onkologickú cytodiagnostiku odoberáme materiál z porcia, pošvy, endocervixu, prípadne z maternicovej dutiny. Z porcia odoberáme náter vždy v pošvových zrkadlách po utretí hlienu, navlhčeným tampónom vo fyziologickom roztoku, aby bolo dobre vidieť rozsah lézie. Hlien prítomný v cytologickom nátere môže spôsobovať neprehľadnosť náteru.
Odber vzoriek pre LBC (Liquid Based Cytology)
Liguid Based Cytology (LBC) alebo tiež tenkovrstvová cytológia predstavuje novú technológiu, v ktorej sa bunky odobraté z krčka maternice pomocou plastickej špachtle a endocervikálneho brushu ihneď uložia do tekutého média (ktoré je na báze etanolu alebo metanolu) v špeciálnej nádobke, tzv. vialke.
Stiahnite si Návod na odber
Odber vzoriek pre negynekologickú cytológiu
Moč
Vždy sa vyšetruje druhý moč. Pacient musí byť o odbere poučený. Na odber sa používajú jednorazové plastové skúmavky s uzáverom. Je potrebné vyznačiť, o aký moč ide: spontánny, katetrizovaný, výplach alebo laváž. Moč je nutné čo najskôr doručiť do laboratóriá a do odoslania uchovávať v chladničke.
Ostatné telesné tekutiny (výpotky, punktáty)
Odbery iných telových tekutín vykonáva vždy lekár. Ide o tenkoihlové biopsie, odbery tekutín z telových dutín. Odobraté tekutiny sa dodávajú v stave, v akom boli odobraté v dobre uzatvorených nádobách a je nutné ich čo najskôr doručiť do laboratória najneskôr do 48 hodín od odberu, pričom musia byť po celý čas uchované v chlade.
Nátery (z prsníkovej bradavky, aspiračná cytológia: mliečna zľaza, štítna žľaza a iné)
Nátery vykonáva lekár na podložné sklíčko, ktoré sa fixujú. (Pozri fixácia vzoriek)
Spútum
Odber materiálu sa vykonáva exacerbáciou / vykašľaním obsahu z dolných dýchacích ciest do nádoby – spútovky s fixačným roztokom. (Pozri fixácia vzoriek)
Fixácia vzoriek
Fixácia vzoriek pre gynekologickú cytológiu
Nátery sa fixujú okamžite. Používajú sa dva druhy fixácie :
Izopropylalkohol – okamžité ponorenie do kyvety s fixačným roztokom a fixovanie 20 min. Veľmi dôležitá je výmena fixačného roztoku približne po 20 sklíčkach, aby sa zachovala jeho koncentrácia.
fixačný sprej – zo vzdialenosti 20-30 cm náter zastriekať jemnou vrstvou aerosólu a nechať uschnúť.
Takto fixovanú, vysušenú a riadne označenú vzorku je potrebné uložiť tak, aby nedošlo ku kontaktu s ďalšími chemikáliami, ktoré by mohli ovplyvniť spracovanie vzorky v laboratóriu, preto je vhodné uložiť ju do uzatvárateľnej transportnej kazety, v ktorej je aj doručená do laboratória na ďalšie pracovanie, t.j. farbenie
Fixácia vzoriek pre negynekologickú cytológiu
- Moč v prípade fixácie fixovať roztokom 1 % merthyolátu sodného a to v pomere 10 ml moču: 5 kvapiek fixačného roztoku.
- Nátery z aspiračnej cytológie (prsník, štítna žľaza a iné) fixovať izopropylalkoholom 20 minút alebo fixačným sprejom.
- Spútum: zaliať fixačným roztokom – zmes 40 % formaldehydu a 96 % benzinolalkoholu v pomere 1:9.
Chyby pri fixácii
- oneskorené fixovanie náteru (náter je vysušený, na bunkách sú artefakty v podobe hnedých škvŕn, čo znemožňuje objektívne hodnotenie),
- nedostatočná fixácia (nízka koncentrácia fixačného roztoku alebo krátka doba fixácie, náter sa nedostatočne zafarbí),
- príliš dlhá fixácia (opäť slabé zafarbenie náteru, tzv. “vyblednuté sklíčko”),
- znečistený fixačný roztok (zdroj rôznych artefaktov na preparáte, prípadne nečistoty kontaminujúce preparát prekrývajú epitélie a sťažujú, resp. znemožňujú hodnotenie).
Označenie materiálu
Každý materiál musí byť jednoznačne identifikovateľný – na transportnej nádobe musí byť meno a priezvisko pacienta a rok jeho narodenia, v prípade cytologických náterov musí byť podložné sklo označené číslom prideleným v ambulancii lekára požadujúceho dané vyšetrenie.
S materiálom musí byť doručená aj žiadanka, ktorá musí obsahovať:
- meno a priezvisko pacienta,
- rodné číslo pacienta,
- označenie zdravotnej poisťovne pacienta,
- medzinárodný kód diagnózy,
- odtlačok pečiatky, kód a podpis lekára, kód poskytovateľa,
- ďalšie údaje potrebné na požadované vyšetrenie (PM, klinické údaje, čas odberu)
Odmietnutie vzorky biologického materiálu laboratóriom
Laboratórium za určitých okolností môže odmietnuť prijať a vyšetriť biologický materiál, a to v prípade, že:
- na žiadanke alebo nádobke s biologickým materiálom nie sú uvedené alebo sú nečitateľné údaje dôležité na identifikáciu vzorky,
- k materiálu nie je priložená žiadanka,
- nesúhlasia údaje na nádobke a žiadanke,
- je dodaný materiál, u ktorého boli zjavne porušené zásady správneho odberu, transportu alebo uloženia a je znehodnotený tak, že ho nie je možné vyšetriť,
- je kontaminovaná žiadanka alebo vonkajšia strana transportnej nádoby.
Transport materiálu
Materiál spolu s vyplnenou žiadankou je transportovaný prostredníctvom dopravnej služby našej spoločnosti do laboratória, v prípade satelitných laboratórií, ktoré sa nachádzajú priamo v nemocniciach alebo na poliklinikách, sa takto pripravený biologický materiál doručí do príslušného laboratória spoločnosti Medicyt, s.r.o.
Pre získanie informácií kontaktujte náš dispečing v pracovných dňoch od 7.00 – 15.30 hod.:
Klientske centrum: 0800 00 30 30 (bezplatne)
E-mail: dispecing@medirex.sk
Odporúčania
Počet a závažnosť chýb v predanalytickej fáze so zameraním na cytologické a bioptické vyšetrenia je možné znížiť dodržiavaním týchto hlavných zásad minimalizácie chýb v predanalytickej fáze:
- identifikovať pacienta, a tým zabrániť zámene,
- skontrolovať označenie žiadaniek a odberových nádob s biologickým materiálom,
- používať vhodné transportné nádoby,
- používať správne fixačné roztoky a v dostatočnom množstve,
- podložné sklá uskladňovať a transportovať v transportných kazetách na to určených,
- nevystavovať vzorku extrémnym teplotám a svetlu,
- vzorku včas zaslať do laboratória.
Vzhľadom na to, že v súčasnosti sú s pribúdajúcimi kvalitnými prístrojovými technológiami a reagenciami sprísnené požiadavky na spracovanie vzoriek, t.j.:
- na kvalitu odberu biologického materiálu,
- transport do laboratória,
- prípravu vzorky,
- skladovanie biologického materiálu.
Podporný servis pre našich klientov
- poskytovania spotrebného materiálu (žiadanky, podložné sklá, odberové cytobrushe, transportné nádoby, fixačné roztoky),
- vlastného systému na transport vzoriek a výsledkov,
- služieb obchodného oddelenia, ktoré pravidelne monitoruje potreby a požiadavky klientov.